### 细胞简介
HL-1心肌细胞系源自一只成年雌性近交系C57BLy6J小鼠的切除皮下肿瘤,这只小鼠是转基因小鼠,转染了由心房利钠因子启动子和SV40区域组成的融合基因。该细胞系不仅能够持续分裂和自发收缩,还能保持已分化的心脏表型。HL-1细胞能够连续传代而不失去特异性心肌细胞表型,广泛应用于研究正常心肌细胞的信号转导、细胞代谢及转录调控等功能,同时也用于体外模拟诸如缺氧、高血糖-高胰岛素血症、细胞凋亡和缺血-再灌注等病理状态。
### HL-1细胞培养的关键要点
HL-1细胞系已成为科学家在心脏生理、病理及药物筛选中的重要工具。然而,HL-1细胞的培养并非易事。接下来,我们将揭示HL-1细胞培养的注意事项,以助您在心脏研究的旅程中更为顺利。
#### 1. 培养基准备
HL-1细胞的生长依赖特制的培养基,通常包括以下成分:
- Claycomb培养基:这是HL-1细胞的标准培养基,需添加10%胎牛血清(FBS)。
- 添加剂:包括去甲肾上腺素(0.1 mM)和L-谷氨酰胺(2 mM)。
- 推荐使用中乔新舟的完全培养基。
#### 2. 细胞培养注意事项
- HL-1细胞贴壁性差,培养时可能出现一些圆形细胞。建议使用Corning的高吸附cellbinding细胞培养瓶,或者预先用明胶基质包被的培养瓶。
- HL-1细胞应在生长至80%时进行传代,细胞消化时间约需8-15分钟。
- 培养基在2-3天内不需更换,深色或黑色变化是正常现象。
- 为确保培养基的新鲜,建议避光保存,减缓添加剂降解。
- 严格遵守无菌操作,定期检测是否有支原体污染。
#### 3. 细胞信息
HL-1细胞呈现典型的梭形或多边形,部分细胞贴壁不牢固。细胞的倍增时间大约为35-50小时,生长速率较慢。培养液更换频率为每周2-3次。
#### 4. 细胞复苏
从液氮中取出冻存的HL-1细胞,迅速在37℃水浴中解冻,并将细胞悬液转移至含预温培养基的离心管中。以1000rpm离心5分钟并弃去上清液,重悬细胞后接种于预涂明胶的培养皿中。
#### 5. 细胞传代
当细胞密度达到80%-90%时进行传代,弃去旧培养基并用PBS洗涤细胞,然后用胰酶-EDTA溶液消化8-15分钟,最后加入完全培养基终止消化。
#### 6. 细胞冻存
选择对数生长期的细胞进行收集,用冻存液重悬细胞并分装至冻存管中,最终转移至液氮中进行长期保存。
### HL-1细胞的应用前景
得益于其独特的心肌细胞特性,HL-1细胞在心血管研究中的潜力巨大。它们可用于构建疾病模型、进行药物筛选及揭示心脏发育与信号通路的分子机制。
金年会金字招牌诚信至上,HL-1细胞的培养挑战虽多,但掌握正确的操作技巧将使其在心脏研究中展现出更高的应用价值。从探索心脏疾病奥秘到开发新型治疗药物,HL-1细胞都是您科研道路上的得力助手。让我们携手呵护这些“跳动”的细胞,为心血管健康贡献力量!